聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)在1967年由Shapir0建立，其原理：聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺(簡(jiǎn)稱Acr)和交聯(lián)劑N，N’一亞甲基雙丙烯酰胺(簡(jiǎn)稱Bis)在催化劑過(guò)硫酸銨(APS)，N，N，N’，N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下，聚合交聯(lián)形成的具有網(wǎng)狀立體結(jié)構(gòu)的凝膠，并以此為支持物進(jìn)行電泳。



聚丙烯酰胺凝膠電泳特性
(1)在一定濃度時(shí)，凝膠透明，有彈性，機(jī)械性能好；
(2)化學(xué)性能穩(wěn)定，與被分離物不起化學(xué)反應(yīng)，在很多溶劑中不溶；
(3)對(duì)pH和溫度變化較穩(wěn)定；
(4)幾乎無(wú)吸附和電滲作用，只要Acr純度高，操作條件一致，則樣品分離重復(fù)性好；
(5)樣品不易擴(kuò)散，且用量少，其靈敏度可達(dá)10-6ug
(6)凝膠孔徑可調(diào)節(jié)，根據(jù)被分離物的分子量選擇合適的濃度，通過(guò)改變單體及交聯(lián)劑的濃度調(diào)節(jié)凝膠的孔徑；
(7)分辨率高，尤其在不連續(xù)凝膠電泳中，集濃縮、分子篩和電荷效應(yīng)為一體。因而較醋酸纖維薄膜電泳、瓊脂糖電泳等有更高的分辨率。


聚丙烯酰胺凝膠電泳注意事項(xiàng)
1．SDS與蛋白質(zhì)的結(jié)合按質(zhì)量成比例(即：1.4g SDS /g蛋白質(zhì))，蛋白質(zhì)含量不可以超標(biāo)，否則SDS結(jié)合量不足。
2．用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子量時(shí)，同時(shí)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。不能利用這次的標(biāo)準(zhǔn)曲線作為下次用。并且sDs—PAGE 測(cè)定分子量有10%誤差，不可完全信任。
3．有些蛋白質(zhì)由亞基(如血紅蛋白)或兩條以上肽鏈(Q一胰凝乳蛋白酶)組成的，它們?cè)趲€基乙醇和SDS的作用下解離成亞基或多條單肽鏈。因此，對(duì)于這一類蛋白質(zhì)，SDS一聚內(nèi)烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定的只是它們的相對(duì)分子量。
4．有的蛋白質(zhì)(如：電荷異?；蚪Y(jié)構(gòu)異常的蛋白質(zhì)；帶有較大輔基的蛋白質(zhì))不能采用該法測(cè)相對(duì)分子量。
5．如果該電泳中出現(xiàn)拖尾、染色帶的背景不清晰等現(xiàn)象，可能是SDS不純引起。

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